La proteína fluorescente amarilla ( YFP ) es un mutante genético de la proteína fluorescente verde (GFP) derivada originalmente de la medusa Aequorea victoria . [1] Su pico de excitación es de 513 nm y su pico de emisión es de 527 nm. [2] Al igual que el GFP original, YFP es una herramienta útil en biología celular y molecular porque los picos de excitación y emisión de YFP se distinguen de GFP, lo que permite el estudio de múltiples procesos/proteínas dentro del mismo experimento.
Tres versiones mejoradas de YFP son Citrine, Venus e Ypet. Tienen una sensibilidad reducida al cloruro, una maduración más rápida y un mayor brillo (definido como el producto del coeficiente de extinción y el rendimiento cuántico ). Normalmente, YFP sirve como aceptor de sensores FRET codificados genéticamente, de los cuales el FP donante más probable es la proteína fluorescente cian monomérica (mCFP). El desplazamiento al rojo en relación con la GFP es causado por una interacción de apilamiento Pi-Pi como resultado de la sustitución T203Y introducida por la mutación, que esencialmente aumenta la polarizabilidad del entorno del cromóforo local además de proporcionar densidad electrónica adicional al cromóforo.
"Venus" contiene una novedosa sustitución de aminoácidos –F46L– que acelera la oxidación del cromóforo a 37°C, el paso limitante de la velocidad de maduración. La proteína tiene otras sustituciones (F64L/ M153T/ V163A/ S175G), lo que permite que Venus se pliegue bien y le otorga relativa tolerancia a la acidosis y al Cl − . [3]
Se necesitaron cuatro mutaciones proteicas de la GFP de tipo salvaje encontrada en la medusa Aequorea Victoria para crear el mutante YFP. La mutación más importante fue la sustitución de treonina por tirosina en la posición del residuo 203 [1] (la sustitución se indica como T203Y, donde T e Y representan el código de una sola letra para los aminoácidos treonina y tirosina, respectivamente).