Nef (factor regulador negativo) es una proteína miristoilada pequeña de 27-35 kDa codificada por lentivirus de primates . Estos incluyen los virus de inmunodeficiencia humana (VIH-1 y VIH-2) y el virus de inmunodeficiencia de simios (VIS). Nef se localiza principalmente en el citoplasma, pero también parcialmente en la membrana plasmática (MP) y es una de las muchas proteínas expresadas por patógenos , conocidas como factores de virulencia , que funcionan para manipular la maquinaria celular del huésped y, por lo tanto, permiten la infección, la supervivencia o la replicación del patógeno. [1] Nef significa "factor negativo" y, aunque a menudo se considera indispensable para la replicación del VIH-1, en huéspedes infectados, la proteína viral eleva notablemente los títulos virales. [2]
La expresión de Nef en etapas tempranas del ciclo de vida viral asegura la activación de las células T y el establecimiento de un estado persistente de infección, dos atributos básicos de la infección por VIH . La expresión viral de Nef induce numerosos cambios dentro de la célula infectada, incluida la modulación de la expresión de proteínas en la superficie celular, la remodelación del citoesqueleto y la transducción de señales. Dado que el estado de activación de la célula infectada desempeña un papel importante en la tasa de éxito de la infección por VIH-1, es importante que las células T en reposo estén preparadas para responder a los estímulos del receptor de células T (TCR). El Nef del VIH-1 reduce el umbral de activación de los linfocitos CD4 + , pero no es suficiente para provocar la activación en ausencia de estímulos exógenos. [3]
Al regular negativamente la expresión de CD4 y Lck en la superficie celular , Nef crea una respuesta TCR estrecha que probablemente optimiza la producción viral del VIH-1 y genera una población de células susceptibles a una mayor infección. Nef redirecciona la Lck activa en la quinasa lejos de la membrana plasmática hacia los endosomas tempranos y de reciclaje (RE), así como hacia la red Trans-Golgi (TGN). Las subpoblaciones de Lck asociadas a RE/TGN en las células que expresan Nef están en la conformación catalíticamente activa y, por lo tanto, son competentes para la señalización. [4] Mientras que la señalización TCR tiene lugar en la membrana plasmática (PM), la activación de la Ras - GTPasa tiene lugar en compartimentos intracelulares, incluido el aparato de Golgi. El enriquecimiento inducido por Nef de Lck activa en estos compartimentos da como resultado un aumento de la actividad RAS localizada y una mayor activación de la quinasa Erk y la producción de interleucina-2 (IL-2). [5] Como se sabe que la IL-2 activa el crecimiento, la proliferación y la diferenciación de las células T para que se conviertan en células T efectoras, se trata de un efecto que busca su propio beneficio y que crea una nueva población de células que el VIH-1 puede infectar. La autoactivación de la célula infectada por la IL-2 también estimula a la célula para que se convierta en una célula efectora e inicie la maquinaria de la que depende el VIH-1 para su propia proliferación.
Para evadir aún más la respuesta inmunitaria del huésped, Nef regula a la baja la superficie celular y la expresión total del modulador inmunitario negativo CTLA-4 al dirigir la proteína a la degradación lisosomal . A diferencia de CD28 que activa las células T, CTLA-4 es esencialmente un "interruptor de apagado" que inhibiría la producción viral si se activara. Los lentivirus como el VIH-1 han adquirido proteínas como Nef que realizan una amplia gama de funciones, incluida la identificación de CTLA-4 antes de que alcance la PM y su marcado para su degradación. [6] También se sabe que Nef fosforila e inactiva Bad , un miembro proapoptótico de la familia Bcl-2, protegiendo así a las células infectadas de la apoptosis . [ cita requerida ]
Se cree que la remodelación del citoesqueleto reduce la señalización del TCR durante la infección temprana y también está modulada en cierto grado por Nef. La remodelación de la actina generalmente está modulada por el factor de corte de actina cofilina. Nef puede asociarse con la quinasa celular PAK2 que fosforila e inactiva la cofilina e interfiere con la señalización temprana del TCR.
La cohorte del banco de sangre de Sydney (SBBC) estaba formada por un grupo de ocho pacientes que eran asintomáticos muchos años después de la infección inicial por transfusión de sangre de un donante infectado. Los análisis posteriores demostraron que la cepa del virus era una variante con deleción de Nef. [7]
No se ha probado una vacuna con el virus Nef -delecionado en humanos, aunque se probó con éxito en macacos Rhesus . [8] [9]