En biología molecular, un primosoma es un complejo proteico responsable de crear cebadores de ARN en ADN monocatenario durante la replicación del ADN .
El primosoma consta de siete proteínas: DnaG primasa , DnaB helicasa , DnaC helicasa auxiliar, DnaT, PriA, Pri B y PriC. En cada horquilla de replicación , el primosoma se utiliza una vez en la cadena principal de ADN y repetidamente, iniciando cada fragmento de Okazaki , en la cadena de ADN rezagada . Inicialmente, el complejo formado por PriA, PriB y PriC se une al ADN. Luego, el complejo de helicasa DnaB-DnaC se une junto con DnaT. Esta estructura se conoce como preprimosoma. Finalmente, DnaG se unirá al preprimosoma formando un primosoma completo. El primosoma une de 1 a 10 nucleótidos de ARN al ADN monocatenario creando un híbrido ADN-ARN. Esta secuencia de ARN se utiliza como cebador para iniciar la ADN polimerasa III . Las bases de ARN son finalmente reemplazadas por bases de ADN por la nucleasa ARNasa H (eucariotas) o la nucleasa ADN polimerasa I (procariotas). La ADN ligasa actúa entonces para unir los dos extremos.
El ensamblaje del primosoma de Escherichia coli requiere seis proteínas, PriA, PriB, PriC, DnaB, DnaC y DnaT, que actúan en un sitio de ensamblaje del primosoma (pas) en un ADN monocatenario (8s) recubierto de SSB. El ensamblaje se inicia mediante interacciones de PriA y PriB con ssDNA y el pas. PriC, DnaB, DnaC y DnaT actúan luego sobre el complejo PriAPriB-ADN para producir el primosoma. [1]
Los primosomas son conjuntos de nucleoproteínas que activan las horquillas de replicación del ADN. Su función principal es reclutar la helicasa replicativa en el ADN monocatenario. El primosoma de "reinicio de la replicación", definido en Escherichia coli , está involucrado en la reactivación de las horquillas de replicación detenidas. La unión de la proteína PriA al ADN bifurcado desencadena su ensamblaje. PriA se conserva en bacterias, pero sus socios primosomales no. En Bacillus subtilis, el análisis genético ha revelado tres proteínas primosomales, DnaB , DnaD y DnaI , que no tienen homólogos obvios en E. coli . Están involucradas en la función del primosoma tanto en las horquillas de replicación detenidas como en el origen cromosómico. Nuestro análisis bioquímico de las proteínas DnaB y DnaD desentraña su papel en el ensamblaje del primosoma. Ambos son multiméricos y se unen individualmente al ADN. Además, DnaD estimula las actividades de unión de DnaB. El DnaD solo y el par DnaD/DnaB interactúan específicamente con PriA de B. subtilis en varios sustratos de ADN. Esto sugiere que el ensamblaje de nucleoproteínas es secuencial en el orden PriA, DnaD, DnaB. El sustrato de ADN preferido imita una horquilla de replicación de ADN detenida con una hebra rezagada no replicada, estructuralmente idéntica a un producto de reparación recombinatoria de una horquilla de replicación detenida.