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Trampa genética

La captura de genes es un método de alto rendimiento que se utiliza para introducir mutaciones insercionales en el genoma de un organismo.

Método

El atrapamiento se realiza con vectores de captura de genes cuyo elemento principal es un casete de atrapamiento de genes que consiste en un gen reportero sin promotor y/o un marcador genético seleccionable , flanqueado por un sitio de empalme 3' aguas arriba (aceptor de empalme; SA) y una secuencia de terminación transcripcional aguas abajo (secuencia de poliadenilación ; poliA).

Cuando se inserta en un intrón de un gen expresado, el casete de trampa génica se transcribe a partir del promotor endógeno de ese gen en forma de una transcripción de fusión en la que el o los exones aguas arriba del sitio de inserción se empalman en el marco del gen marcador/reportero seleccionable. Dado que la transcripción se termina prematuramente en el sitio de poliadenilación insertado, la transcripción de fusión procesada codifica una versión truncada y no funcional de la proteína celular y del gen marcador/reportero seleccionable. Por lo tanto, las trampas génicas inactivan y notifican simultáneamente la expresión del gen atrapado en el sitio de inserción, y proporcionan una etiqueta de ADN (etiqueta de secuencia de trampa génica, GTST) para la rápida identificación del gen alterado . [1] [2]

Acceso

El Consorcio Internacional de Trampas Genéticas está centralizando los datos y suministrando líneas celulares modificadas. [3]

Referencias

  1. ^ Cobellis, G; Nicolaus, G; et al. (2005). "Etiquetado de genes con sitios de intercambio de casetes". Nucleic Acids Res . 33 (4): e44. doi :10.1093/nar/gni045. PMC  552971 . PMID  15741177.
  2. ^ De-Zolt, S; Schnutgen, F; et al. (2006). "Captura de alto rendimiento de genes de la vía secretora en células madre embrionarias de ratón". Nucleic Acids Res . 34 (3): 25. doi :10.1093/nar/gnj026. PMC 1369290 . PMID  16478711. 
  3. ^ "IGTC, Consorcio Internacional de Trampas Genéticas". www.genetrap.org . Consultado el 11 de febrero de 2018 .

Lectura adicional

Enlaces externos