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Microscopía de contraste de modulación de Hoffman

Células de menisco humano mediante contraste de modulación de Hoffman. Barra de escala = 10 μm. [1]

La microscopía de contraste de modulación de Hoffman (microscopía HMC) es una técnica de microscopía óptica para mejorar el contraste en muestras biológicas no teñidas. La técnica fue inventada por Robert Hoffman en 1975. [2] Al igual que la microscopía de contraste de interferencia diferencial (microscopía DIC), el contraste se aumenta mediante el uso de componentes en la trayectoria de la luz que convierten los gradientes de fase en la muestra en diferencias en la intensidad de la luz que se representan en una imagen que parece tridimensional. La apariencia 3D puede ser engañosa, ya que una característica que parece proyectar una sombra puede no tener necesariamente una geometría física distintiva correspondiente a la sombra. La técnica es particularmente adecuada para el seccionamiento óptico a aumentos menores. [3] [4]

Un ejemplo del uso de la iluminación HMC es en la fertilización in vitro , donde bajo la iluminación de campo claro el ovocito casi transparente es difícil de ver con claridad.

Los sistemas HMC suelen estar compuestos por un condensador con una abertura de ranura, un objetivo con una abertura de ranura y un polarizador que se coloca entre el condensador y la fuente de iluminación y se utiliza para controlar el grado de contraste. El principio de HMC lo utilizan varios fabricantes de microscopios que han introducido sus propias variantes de la técnica.

Referencias

  1. ^ Figura 1 en Cultivo tridimensional de células meniscales humanas: matriz extracelular y producción de proteoglicanos, Helen E Gruber, David Mauerhan, Yin Chow, Jane A Ingram, H James Norton, Edward N Hanley y Yubo Sun, BMC Biotechnology , 2008, 8:54 , doi :10.1186/1472-6750-8-54.
  2. ^ Robert Hoffman y Leo Gross (1975). "Contraste de modulación". Óptica Aplicada . 14 (5). Microscopio de Óptica Aplicada: 1169–1176. doi :10.1364/AO.14.001169. PMID  20154791.
  3. ^ Douglas B. Murphy (2001): Fundamentos de la microscopía óptica y la obtención de imágenes electrónicas , Wiley-Liss, Inc., Nueva York, ISBN 0-471-25391-X 
  4. ^ "Técnicas de microscopía especializadas: conceptos básicos del contraste de modulación de Hoffman". Centro de aprendizaje de Olympus . Consultado el 4 de abril de 2023 .