El verde de metilo (CI 42585) es una tinción catiónica o con carga positiva relacionada con el verde de etilo que se ha utilizado para teñir ADN desde el siglo XIX. [1] Se ha utilizado para teñir núcleos celulares, ya sea como parte de la tinción clásica de Unna-Pappenheim o como contratinción nuclear desde entonces.
En los últimos años, sus propiedades fluorescentes , [2] cuando se une al ADN, lo han posicionado como útil para la obtención de imágenes en rojo lejano de núcleos de células vivas. [3]
La tinción fluorescente del ADN se utiliza de forma rutinaria en el pronóstico del cáncer. [4]
El verde de metilo también surge como una tinción alternativa para el ADN en geles de agarosa , ensayos fluorométricos y citometría de flujo . [3] [5] También se ha demostrado que se puede utilizar como tinción de viabilidad de exclusión para células. Se ha demostrado que su interacción con el ADN no es intercalante , en otras palabras, no se inserta en el ADN, sino que es electrostática con el surco mayor del ADN . [6] Se utiliza en combinación con pironina en la tinción de verde de metilo-pironina , que tiñe y diferencia el ADN y el ARN.
Cuando se excita a 244 o 388 nm en una solución acuosa neutra, el verde de metilo produce una emisión fluorescente a 488 o 633 nm, respectivamente. La presencia o ausencia de ADN no afecta estos comportamientos de fluorescencia. Cuando se une al ADN en condiciones acuosas neutras, el verde de metilo también se vuelve fluorescente en el rojo lejano con un máximo de excitación de 633 nm y un máximo de emisión de 677 nm. [3]
Las preparaciones comerciales de verde de metilo suelen estar contaminadas con violeta cristal . El violeta cristal se puede eliminar mediante extracción con cloroformo . [3]
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