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Método de fluorescencia de Falck-Hillarp

El método de fluorescencia de Falck-Hillarp ( método FH ) es una técnica que permite demostrar y estudiar, con una precisión y susceptibilidad únicas, ciertas monoaminas , entre ellas las tres catecolaminas dopamina , noradrenalina y adrenalina , así como la serotonina y sustancias relacionadas. [1] [2]

El método se basa en el importante y decisivo descubrimiento de que estos compuestos son capaces de reaccionar con el formaldehído –en ausencia casi total de agua– para formar fluoróforos , es decir, moléculas que, al ser irradiadas con luz invisible para el ojo, emitirán luz visible. Esto sucede en estado “seco”, sin extraer las monoaminas de las células durante todo el procedimiento, un proceso que comienza con la separación de una muestra de tejido y termina con un corte fino de tejido que puede examinarse en un microscopio de fluorescencia.

El método FH permitió por primera vez al investigador observar la luz de estas monoaminas en el microscopio y determinar con precisión en qué células se encontraban, entendiendo así su función. [3] El método fue desarrollado por Bengt Falck y Nils-Åke Hillarp en los años 60 en el Departamento de Histología de la Universidad de Lund . Gracias a una intensa investigación neurobiológica fue posible demostrar la presencia de monoaminas en las células nerviosas pertenecientes al sistema nervioso central y periférico y comprender por primera vez que estas sustancias actúan como sustancias señalizadoras, es decir, transmisoras.

La publicación inicial, escrita ya en 1961, [4] describía un estudio de amplio alcance de los nervios que irrigan un gran número de órganos del cuerpo. Este trabajo validó el concepto de Ulf von Euler , el ganador del premio Nobel, de que la noradrenalina es la sustancia señal en los nervios autónomos periféricos. En el mismo año, esta primera publicación fue seguida por una explicación de la base química del método F–H.

Las membranas muy delgadas, como el iris o el mesenterio de la rata, no necesitan ser seccionadas para estudios microscópicos, sino que pueden simplemente extenderse sobre vidrio, secarse y luego exponerse a formaldehído gaseoso para su posterior estudio con un microscopio de fluorescencia.

La publicación sobre los antecedentes químicos fue nombrada posteriormente entre los "200 artículos más citados de todos los tiempos". [ cita requerida ]

En 2012, la Facultad de Medicina de la Universidad de Lund organizó un simposio “Del nervio a las pastillas” para celebrar el 50º aniversario de la publicación inicial del método FH.

Referencias

  1. ^ Falck, B. (1962). "Observaciones sobre las posibilidades de localización celular de monoaminas mediante un método de fluorescencia". Acta Physiol. Scand . 56 (suppl. 197): 1–25.
  2. ^ Falck, B.; Hillarp, ​​NA; Thieme, G.; Torp, A. (1982). "Fluorescencia de catecolaminas y compuestos relacionados condensados ​​con formaldehído". Boletín de investigación cerebral . 9 (1–6): xi–xv. doi :10.1016/0361-9230(82)90113-7. PMID  7172023. S2CID  4706681.
  3. ^ "El método Falck-Hillarp: una revolución en el estudio de los sistemas monoamínicos en el sistema nervioso central". Centro de Neurociencia Wallenberg, Universidad de Lund . 2019-01-09.
  4. ^ FALCK B; TORP A (1962). "Nueva evidencia de la localización de la noradrenalina en las terminales nerviosas adrenérgicas". Medicina Experimentalis . 6 (3): 169–72. doi :10.1159/000135153. PMID  13891409.

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