Un detector ultravioleta (también conocido como detector UV o detector UV-Vis ) [1] [2] es un tipo de detector de cromatografía no destructiva que mide la cantidad de luz ultravioleta o visible absorbida por los componentes de la mezcla que se eluyen de la columna de cromatografía. A menudo se utilizan como detectores para cromatografía líquida de alto rendimiento . [3]
La gran mayoría de los sistemas de cromatografía líquida están equipados con detectores de absorción ultravioleta (UV) , y la gran mayoría de ellos son detectores de longitud de onda variable, que en realidad son espectrofotómetros UV en flujo. En este detector, se decide de antemano a qué longitud de onda se necesita la detección, y su absorbancia en función del tiempo se recoge en un formato gráfico llamado cromatograma.
Como se puede observar en la Figura 1, estos detectores cuentan con una fuente de luz , un elemento de dispersión que es una rejilla o prisma de difracción , una celda de flujo, a donde llega la muestra directamente desde la columna cromatográfica , un banco óptico de lentes y espejos, y un diodo que recibe la luz proveniente del sistema óptico y la traduce en una señal proporcional a la intensidad de la luz. Cuando el usuario selecciona una longitud de onda para el detector, el sistema óptico hace girar la rejilla o prisma en el espacio, de manera que la longitud de onda deseada pase a través del sistema óptico, luego la celda de flujo y llegue al diodo. El detector UV/VIS produce entonces un cromatograma como una salida bidimensional (2D). Esta salida traza el tiempo en el eje x y la respuesta en unidades de absorbancia (UA) en el eje y. Luego se analiza el cromatograma integrando las curvas de picos para obtener su área, luego obteniendo su tiempo de retención (RT) a partir del pico máximo para identificarlos, y luego se realiza un análisis cuantitativo, comparando su área con las de muestras cuyas concentraciones se conocen, es decir, estándares.
En los últimos años, se han utilizado cada vez más detectores UV-VIS más avanzados, basados en matrices de diodos y en la recopilación de todo el espectro en cualquier momento dado de la recopilación de datos. Se denominan detectores de matriz de diodos y recopilan espectros UV completos de cada punto de los picos de elución, al tiempo que funcionan como un detector UV-VIS de múltiples longitudes de onda. De esta manera, brindan información adicional, que ayuda a comprender mejor la naturaleza de las sustancias que aparecen en el cromatograma y permite su identificación. [4] Dado que el detector facilita una mejor identificación de los picos, es el detector preferido para el desarrollo de métodos de HPLC.
En la Figura 1 se muestra un esquema de los sistemas ópticos. El banco óptico del detector de absorbancia variable UV-VIS muestra cómo se coloca la celda de flujo después del sistema óptico, incluido el monocromador, que normalmente tiene una rendija física y una rejilla móvil, de modo que se ilumina con una longitud de onda seleccionada y llega a un fotodiodo. Sin embargo, el banco del detector de matriz de diodos está configurado de modo que la celda de flujo se coloca antes de las partes ópticas, de modo que el haz que contiene todo el espectro pasa a través de ella. Las partes ópticas también constan de un monocromador y una rendija, pero con una rejilla fija, que dispersa la luz sobre un elemento de formación de imágenes de matriz de diodos.