En química , la síntesis en fase sólida es un método en el que las moléculas se unen covalentemente a un material de soporte sólido y se sintetizan paso a paso en un único recipiente de reacción utilizando química de grupos protectores selectivos. Los beneficios en comparación con la síntesis normal en estado líquido incluyen:
La reacción puede completarse y obtener altos rendimientos mediante el uso de un exceso de reactivo . En este método, los bloques de construcción están protegidos en todos los grupos funcionales reactivos . El orden de las reacciones de los grupos funcionales puede controlarse mediante el orden de desprotección. Este método se utiliza para la síntesis de péptidos , [1] [2] ácido desoxirribonucleico ( ADN ), ácido ribonucleico ( ARN ) y otras moléculas que deben sintetizarse en una determinada alineación. [3] Más recientemente, este método también se ha utilizado en química combinatoria y otras aplicaciones sintéticas. El proceso fue desarrollado originalmente en las décadas de 1950 y 1960 por Robert Bruce Merrifield para sintetizar cadenas peptídicas, [4] y que fue la base para su Premio Nobel de Química en 1984 . [5]
En el método básico de síntesis en fase sólida, se utilizan bloques de construcción que tienen dos grupos funcionales. Uno de los grupos funcionales del bloque de construcción suele estar protegido por un grupo protector. El material de partida es una perla que se une al bloque de construcción. Primero, esta perla se añade a la solución del bloque de construcción protegido y se agita. Una vez completada la reacción entre la perla y el bloque de construcción protegido, se retira la solución y se lava la perla. Luego se elimina el grupo protector y se repiten los pasos anteriores. Una vez finalizados todos los pasos, el compuesto sintetizado se escinde químicamente de la perla.
Si se sintetiza un compuesto que contiene más de dos tipos de bloques de construcción, se agrega un paso antes de la desprotección del bloque de construcción unido a la perla; un grupo funcional que está en la cuenta y no reaccionó con un bloque de construcción agregado tiene que ser protegido por otro grupo protector que no se elimina en la condición desprotectora del bloque de construcción. Mediante este paso sólo se evitan los subproductos que carecen del componente básico de este paso. Además, este paso facilita la purificación del compuesto sintetizado después de la escisión de la perla.
La síntesis en fase sólida es una técnica común para la síntesis de péptidos . Por lo general, los péptidos se sintetizan desde el lado del grupo carbonilo (terminal C) al lado del grupo amino (terminal N) de la cadena de aminoácidos en el método SPPS, aunque los péptidos se sintetizan biológicamente en la dirección opuesta en las células. En la síntesis de péptidos, un aminoácido protegido con amino se une a un material o resina en fase sólida (más comúnmente, perlas de poliestireno poco reticuladas ), formando un enlace covalente entre el grupo carbonilo y la resina, generalmente un amido o un éster. vínculo. [6] Luego, el grupo amino se desprotege y se hace reaccionar con el grupo carbonilo del siguiente aminoácido N-protegido. La fase sólida ahora lleva un dipéptido. Este ciclo se repite para formar la cadena peptídica deseada. Una vez completadas todas las reacciones, el péptido sintetizado se escinde de la perla.
Los grupos protectores de los grupos amino más utilizados en la síntesis de péptidos son el grupo 9-fluorenilmetiloxicarbonilo ( Fmoc ) y el t-butiloxicarbonilo ( Boc ). Varios aminoácidos llevan grupos funcionales en la cadena lateral que deben protegerse específicamente para que no reaccionen con los aminoácidos N-protegidos entrantes. A diferencia de los grupos Boc y Fmoc, estos tienen que ser estables durante el transcurso de la síntesis de péptidos, aunque también se eliminan durante la desprotección final de los péptidos.
También se sintetizan mediante el método de fase sólida fragmentos relativamente cortos de ADN , ARN y oligonucleótidos modificados. Aunque los oligonucleótidos se pueden sintetizar en un matraz, casi siempre se sintetizan en fase sólida utilizando un sintetizador de ADN/ARN. Para una revisión más completa, consulte síntesis de oligonucleótidos . El método de elección es generalmente la química de la fosforamidita, desarrollada en la década de 1980.