Prueba de fijación del complemento

La prueba de fijación del complemento es una prueba médica inmunológica que se puede utilizar para detectar la presencia de un anticuerpo específico o de un antígeno específico en el suero de un paciente , en función de si se produce o no fijación del complemento . Se utilizó ampliamente para diagnosticar infecciones, particularmente con microbios que no se detectan fácilmente mediante métodos de cultivo, y en enfermedades reumáticas. Sin embargo, en los laboratorios de diagnóstico clínico ha sido reemplazado en gran medida por otros métodos serológicos como ELISA y por métodos de detección de patógenos basados ​​en ADN, particularmente la PCR .

Proceso

El sistema del complemento es un sistema de proteínas séricas que reaccionan con complejos antígeno-anticuerpo. Si esta reacción ocurre en la superficie de una célula, dará como resultado la formación de poros transmembrana y, por lo tanto, la destrucción de la célula. Los pasos básicos de una prueba de fijación del complemento son los siguientes: ^[1]

1. El suero se separa del paciente.
2. Los pacientes naturalmente tienen diferentes niveles de proteínas del complemento en su suero. Para anular cualquier efecto que esto pueda tener en la prueba, las proteínas del complemento en el suero del paciente deben destruirse y reemplazarse por una cantidad conocida de proteínas del complemento estandarizadas.
   1. El suero se calienta de tal manera que todas las proteínas del complemento (pero ninguno de los anticuerpos) que contiene se destruyen. (Esto es posible porque las proteínas del complemento son mucho más susceptibles a la destrucción por el calor que los anticuerpos).
   2. Se añade al suero una cantidad conocida de proteínas del complemento estándar. (Estas proteínas se obtienen frecuentemente del suero de cobaya).
3. El antígeno de interés se añade al suero.
4. Se añaden al suero glóbulos rojos de oveja (sRBC) ^[2] que se han unido previamente a anticuerpos anti-sRBC. La prueba se considera negativa si la solución se vuelve rosa en este punto y positiva en caso contrario.

Si el suero del paciente contiene anticuerpos contra el antígeno de interés, se unirán al antígeno en el paso 3 para formar complejos antígeno-anticuerpo. Las proteínas del complemento reaccionarán con estos complejos y se agotarán. Por lo tanto, cuando se añaden los complejos sRBC-anticuerpo en el paso 4, no quedará complemento en el suero. Sin embargo, si no hay anticuerpos contra el antígeno de interés, el complemento no se agotará y reaccionará con los complejos sRBC-anticuerpo agregados en el paso 4, lisando los sRBC y derramando su contenido en la solución, tornando así la solución de color rosa. . ^[1]

Prueba de antígeno

Si bien la detección de anticuerpos es el formato de prueba más común, es igualmente posible detectar la presencia de antígeno. En este caso, el suero del paciente se complementa con anticuerpos específicos para inducir la formación de complejos; La adición del complemento y del indicador sRBC se realiza como antes. ^{[ cita necesaria ]}

Pruebas semicuantitativas

La prueba puede hacerse cuantitativa configurando una serie de diluciones de suero del paciente y determinando el factor de dilución más alto que aún producirá una prueba de FQ positiva. Este factor de dilución corresponde al título . ^{[ cita necesaria ]}

Referencias

1. "Prueba de animación 4: prueba de fijación del complemento". superiored.mheducation.com .
2. C. Vaman Rao (2005). Inmunología: un libro de texto. Alpha Science Int'l Ltd. págs. ISBN 978-1-84265-255-8. Consultado el 3 de diciembre de 2010 .

enlaces externos

• Complemento+Fijación+Pruebas en los encabezados de materias médicas (MeSH) de la Biblioteca Nacional de Medicina de EE. UU.