La etiqueta NE es una etiqueta de péptido sintético (etiqueta NE) diseñada como una etiqueta de epítopo para la detección, cuantificación y purificación de proteínas recombinantes. Esta secuencia de péptido patentada está compuesta por dieciocho aminoácidos hidrófilos . Este péptido corto no adopta ninguna homología significativa con ninguna proteína existente en la naturaleza. Este péptido NE sintético adopta una conformación de espiral aleatoria y muestra una fuerte inmunogenicidad (predicción computacional). Esto es ventajoso para ofrecer una especificidad estricta a las proteínas etiquetadas con NE, que son fáciles de detectar, cuantificar y purificar. [1]
Detección
La etiqueta NE se puede detectar específicamente utilizando un anticuerpo monoclonal de detección anti-NE: una inmunoglobulina de ratón purificada por afinidad, IgG1, que se une específicamente a las proteínas marcadas con NE. Esta conjugación de péptido a anticuerpo se valida en Western blotting , inmunoprecipitación (IP), inmunocitoquímica (IHC) y purificación por afinidad de proteínas de fusión NE (es decir, columna de afinidad). [2] [3]
Secuencias
- La secuencia de ADN de la etiqueta NE es la siguiente: 5' ACC AAA gAA AAC CCg CgT AgC AAC Cag gAA gAA AgC TAT gAT gAT AAC gAA AgC 3'
- La secuencia de aminoácidos correspondiente es: TKENPRSNQEESYDDNES (Thr-Lys-Glu-Asn-Pro-Arg-Ser-Asn-Gln-Glu-Glu-Ser-Tyr-Asp-Asp-Asn-Glu-Ser)
Patentes
- Estados Unidos 8927225
- Documento EP 2328909
- Número de serie 102203119
Referencias
- ^ Ho, Philip WL.; Tse, Zero HM.; Liu, HF.; Lu, S.; Ho, Jessica WM.; Kung, Michelle HW.; Ramsden, David B.; Ho, SL. (2013). "Evaluación de la actividad estrogénica celular basada en la reducción mediada por el receptor de estrógeno de la expresión de la catecol-O-metiltransferasa (COMT) en forma soluble en un sistema basado en ELISA". PLOS ONE . 8 (9): e74065. Bibcode :2013PLoSO...874065H. doi : 10.1371/journal.pone.0074065 . PMC 3765251 . PMID 24040167.
- ^ Tse, HF.; Ho, JC.; Choi, SW.; Lee, YK.; Butler, AW.; Ng, KM.; Siu, CW.; Simpson, MA.; Lai, WH.; Chan, YC.; Au, KW.; Zhang, J.; Lay, KW.; Esteban, MA.; Nicholls, JM.; Colman, A.; Sham, PC. (2013). "Los cardiomiocitos derivados de células madre pluripotentes inducidas específicas del paciente recapitulan los fenotipos patogénicos de la miocardiopatía dilatada debido a una nueva mutación DES identificada por secuenciación completa del exoma". Genética molecular humana . 22 (7): 1395–1403. doi : 10.1093/hmg/dds556 . PMID 23300193.
- ^ Xu, EG.; Ho, Philip WL.; Tse, Zero HM.; Ho, SL.; Leung, KM. (2016). "Revelación de los riesgos ecológicos de los disruptores endocrinos prioritarios en cuatro áreas marinas protegidas de Hong Kong mediante un enfoque integrador". Contaminación ambiental . 215 : 103–112. doi :10.1016/j.envpol.2016.04.090. PMID 27179329.
