La prueba de semillas es un análisis de las semillas para determinar su viabilidad. [ cita requerida ] La prueba de semillas se realiza por diversas razones, entre ellas, con fines de investigación o para determinar si las técnicas de almacenamiento de semillas funcionan. Las pruebas de semillas más comunes incluyen pruebas de germinación, pruebas de viabilidad, pruebas de pureza y pruebas de malezas. Las dos primeras son comunes para la investigación científica. En el caso de las semillas vendidas comercialmente, estas cuatro pruebas se realizan en laboratorios especializados por analistas capacitados y, por lo general, certificados. Las pruebas están diseñadas para evaluar la calidad del lote de semillas que se vende. [1]
Una prueba de germinación informa el porcentaje de semillas que germinaron. En entornos comerciales, las pruebas se realizan generalmente en muestras de 200 o 400 semillas.
La prueba de cloruro de tetrazolio (TZ), a menudo llamada prueba de germinación rápida, es una prueba química que se utiliza para determinar la viabilidad de las semillas y los resultados suelen estar disponibles en un plazo de 24 a 48 horas. La prueba de TZ se diferencia de una prueba de germinación en que la prueba de TZ puede proporcionar una instantánea temprana y rápida de la viabilidad de las semillas, pero no reemplaza la prueba de germinación de semillas más completa. En Canadá, la prueba de TZ no está oficialmente reconocida por la ACIA (excepto en el caso del pasto de trigo occidental , donde el resultado de TZ puede agregarse a la germinación para obtener un total de germinación final). En los Estados Unidos, la prueba de TZ se puede utilizar como reemplazo de una prueba de germinación, aunque generalmente se recomienda una prueba de germinación de seguimiento.
Una prueba de viabilidad (prueba TZ) es una prueba de viabilidad que implica los pasos: preacondicionamiento (imbibición) y luego preparación y tinción (a veces cortando la semilla y luego sumergiéndola en una solución de cloruro de 2,3,5 trifenil tetrazolio ).
Las semillas se dejan en remojo en agua durante la noche. Pueden estar humedecidas previamente, en cuyo caso se deja que las semillas se empapen de agua entre un papel secante de germinación humedecido. Luego se disecan las semillas, ya sea longitudinalmente o transversalmente, con un bisturí para que el embrión quede expuesto a la solución de cloruro de tetrazolio. Se utiliza la mitad de esta semilla para la prueba y se descarta la otra mitad. La tinción se realiza con una solución de cloruro de 2, 3, 5 trifenil tetrazolio (una sal) que se agrega al agua para formar una solución incolora. Las semillas se colocan en una solución al 1% (para legumbres y pastos que no están bisecados) o en una solución diluida al 0,1% para pastos y cereales bisecados. Las cubiertas de las semillas de las legumbres generalmente se deben quitar o pelar antes del examen. Se debe tener cuidado para evitar la rotura de las radículas y otros daños a las semillas.
Las enzimas deshidrogenasas presentes en el tejido vivo reducen el cloruro de tetrazolio a formazán, un compuesto rojizo e insoluble en agua. Esta reacción ocurre en las células vivas o cerca de ellas, que están liberando hidrógeno en los procesos de respiración. Dependiendo del tamaño, todas las semillas se examinan bajo un microscopio con una potencia de 10-30. Las semillas más grandes, como las de los guisantes, se pueden examinar sin microscopio. Los analistas buscan tres cosas: tejidos sanos, tejidos vivos débiles o tejidos muertos. Los tejidos sanos producen un color rojo normal y resisten la penetración del tetrazolio. La velocidad de liberación de hidrógeno en el tejido sano es lenta en comparación con la de los tejidos parcialmente debilitados. Los tejidos vivos débiles producen un color anormal. Estos tejidos han perdido parte de su resistencia inicial a la penetración del tetrazolio. La respiración se acelera y el formazán se produce rápidamente. Durante las primeras etapas del deterioro, estos tejidos se vuelven de un rojo más oscuro (magullados) más rápido que los tejidos sanos y sanos. Los tejidos muertos no se tiñen, permaneciendo generalmente blancos (tejido envejecido) porque la falta de respiración impide la producción de formazán.
Los resultados de la prueba TZ se registran como un porcentaje y, por lo general, se informan en la sección de observaciones del Certificado de análisis de semillas emitido por el laboratorio de semillas. Las semillas duras se deben informar (si corresponde) como un porcentaje y se incluyen en el porcentaje total de semillas viables. Independientemente de cómo se informen, los resultados de la prueba TZ para viabilidad le brindan una estimación del porcentaje máximo de semillas que tienen el potencial de producir plántulas normales.
Una prueba de pureza informa el porcentaje de semilla descrita en la etiqueta que realmente se encuentra en la cantidad de semilla.
Una prueba de malezas examina una muestra de semillas e identifica cada semilla que sea diferente del tipo de semilla etiquetado.