Respuesta de bioluminiscencia al Ca local2+ después de la inyección intraperitoneal de tdTA recombinante en un ratón anestesiado. Superposición de la imagen de reflexión del ratón (escala de grises) y Ca2+ Se muestra la bioluminiscencia inducida (pseudocolor rojo).
La proteína fluorescente roja ( RFP ) es una proteína que actúa como fluoróforo y emite fluorescencia de color rojo anaranjado cuando se excita. La variante original se encuentra de forma natural en el género coral Discosoma y se denomina DsRed . Se han desarrollado varias variantes nuevas mediante mutagénesis dirigida [1] que emiten fluorescencia de color naranja, rojo y rojo lejano. [2]
Características y propiedades
Al igual que la GFP y otras proteínas fluorescentes, la RFP es una proteína con forma de barril compuesta principalmente por motivos de láminas β ; este tipo de pliegue de proteína se conoce comúnmente como barril β .
La masa de RFP es de aproximadamente 25,9 kDa. Su máximo de excitación es de 558 nm y su máximo de emisión es de 583 nm. [3]
Aplicaciones
El RFP se utiliza con frecuencia en la investigación de biología molecular como marcador fluorescente para diversos fines. Se ha demostrado que DsRed es más adecuado para métodos de obtención de imágenes ópticas que EGFP . [4]
Los problemas con las proteínas fluorescentes incluyen el tiempo que transcurre entre la síntesis de proteínas y la expresión de la fluorescencia. DsRed tiene un tiempo de maduración de alrededor de 24 horas, [1] lo que lo hace inadecuado para experimentos que se llevan a cabo en un período de tiempo más corto. Además, DsRed existe en una forma tetramérica, que puede afectar la función de las proteínas a las que está unido. La ingeniería genética ha mejorado la utilidad de RFP al aumentar la velocidad del desarrollo de la fluorescencia y crear variantes monoméricas . [3] [5] Las variantes mejoradas de RFP incluyen las variantes mFruits ( mCherry , mOrange, mRaspberry), mKO, TagRFP, mKate, mRuby, FusionRed, mScarlet y DsRed-Express. [5] [6]
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