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Destechado de celdas

Los procesos más comunes de destechamiento celular. (izquierda) Sándwich de dos células entre dos cubreobjetos. (derecha) El flujo lateral del medio permite romper las células.

El destechamiento celular es uno de los diversos métodos para aislar y exponer la membrana celular de las células . A diferencia de los protocolos de extracción de membrana más comunes que se realizan con múltiples pasos de centrifugación (cuyo objetivo es separar la fracción de membrana de un lisado celular ), en el destechamiento celular el objetivo es rasgar y preservar parches de la membrana plasmática para realizar experimentos in situ utilizando (microscopía y espectroscopia biomédica ).

Historia

La primera observación de la membrana celular bicapa se realizó en 1959 [1] en una sección de una célula utilizando el microscopio electrónico. Pero la primera micrografía del lado interno de una célula data de 1977 [2] realizada por MV Nermut. El profesor John Heuser hizo contribuciones sustanciales en el campo, al obtener imágenes de la estructura interna detallada de la membrana y del citoesqueleto unido a ella con un uso extensivo del microscopio electrónico.

Sólo después del desarrollo del microscopio de fuerza atómica operado en líquido fue posible obtener imágenes de las membranas celulares en condiciones casi fisiológicas [3] y comprobar sus propiedades mecánicas. [4]

Métodos

Véase también

Referencias

  1. ^ Robertson, JD (1959). "La ultraestructura de las membranas celulares y sus derivados". Biochem. Soc. Symp .
  2. ^ Nermut, MV; Williams, Lynn D. (1977). "Fracturación por congelación de monocapas (capas capilares) de células, membranas y virus: algunas consideraciones técnicas". Journal of Microscopy . 110 (2): 121–132. doi :10.1111/j.1365-2818.1977.tb00023.x. ISSN  1365-2818. PMID  335072. S2CID  8682569.
  3. ^ Cho, Sang-Joon; Ahn, Jeonghun; Youn, Daehwan; Minakata, Shiho; Yoshimura, Azumi; Usukura, Jiro (1 de octubre de 2012). "Uso de la técnica de destechado para la obtención de imágenes microscópicas de fuerza atómica del citoesqueleto intracelular en condiciones acuosas". Journal of Electron Microscopy . 61 (5): 321–326. doi : 10.1093/jmicro/dfs055 . ISSN  0022-0744. PMID  22872282.
  4. ^ ab Galvanetto, Nicola (1 de diciembre de 2018). "Destechamiento de células individuales: sondeo de la topología y nanomecánica de membranas nativas". Biochimica et Biophysica Acta (BBA) - Biomembranas . 1860 (12): 2532–2538. arXiv : 1810.01643 . doi :10.1016/j.bbamem.2018.09.019. ISSN  0005-2736. PMID  30273580. S2CID  52897823.
  5. ^ Nermut, MV; Williams, Lynn D. (1977). "Fracturación por congelación de monocapas (capas capilares) de células, membranas y virus: algunas consideraciones técnicas". Journal of Microscopy . 110 (2): 121–132. doi :10.1111/j.1365-2818.1977.tb00023.x. ISSN  1365-2818. PMID  335072. S2CID  8682569.
  6. ^ Heuser, John (2000). "La producción de 'cortezas celulares' para microscopía óptica y electrónica". Tráfico . 1 (7): 545–552. doi : 10.1034/j.1600-0854.2000.010704.x . ISSN  1600-0854. PMID  11208142.
  7. ^ Usukura, Jiro; Ito, Shûichi; Yagi, Akira; Narita, Akihiro; Usukura, Eiji (7 de junio de 2016). "Un método de destechado para observar el citoesqueleto directamente con resolución molecular mediante microscopía de fuerza atómica". Informes científicos . 6 : 27472. doi : 10.1038/srep27472. ISSN  2045-2322. PMC 4895337 . PMID  27273367.