El rojo de metilo (ácido 2-( N , N -dimetil-4-aminofenil) azobencenocarboxílico), también llamado CI Acid Red 2 , es un colorante indicador que se vuelve rojo en soluciones ácidas . Es un colorante azoico y es un polvo cristalino de color rojo oscuro. El rojo de metilo es un indicador de pH ; es rojo en pH por debajo de 4,4, amarillo en pH por encima de 6,2 y naranja en el medio, con un p K a de 5,1. [2] El murexida y el rojo de metilo se investigan como potenciadores prometedores de la destrucción sonoquímica de contaminantes de hidrocarburos clorados . El rojo de metilo está clasificado por la IARC en el grupo 3 , sin clasificar en cuanto a potencial cancerígeno en humanos.
Como colorante azoico, el rojo de metilo se puede preparar mediante diazotación del ácido antranílico , seguida de una reacción con dimetilanilina : [3]
El color del rojo de metilo depende del pH, porque la protonación hace que adopte una estructura hidrazona / quinona .
El rojo de metilo tiene un uso especial en histopatología para mostrar la naturaleza ácida del tejido y la presencia de organismos con paredes celulares de naturaleza ácida.
El rojo de metilo es detectablemente fluorescente en agua:metanol 1:1 (pH 7,0), con un máximo de emisión a 375 nm ( UVA ) tras excitación con luz de 310 nm ( UVB ). [4]
En microbiología , el rojo de metilo se utiliza en la prueba del rojo de metilo (prueba MR), utilizada para identificar bacterias que producen ácidos estables mediante mecanismos de fermentación ácida mixta de glucosa ( cf. prueba de Voges-Proskauer ).
La prueba MR, la parte "M" de las cuatro pruebas IMViC , se utiliza para identificar bacterias entéricas en función de su patrón de metabolismo de la glucosa. Todas las bacterias entéricas producen inicialmente ácido pirúvico a partir del metabolismo de la glucosa. Algunas bacterias entéricas utilizan posteriormente la vía de los ácidos mixtos para metabolizar el ácido pirúvico en otros ácidos, como el ácido láctico , el acético y el fórmico . Estas bacterias se denominan rojo de metilo positivo e incluyen Escherichia coli y Proteus vulgaris . Otras bacterias entéricas utilizan posteriormente la vía del butilenglicol para metabolizar el ácido pirúvico en productos finales neutros. Estas bacterias se denominan rojo de metilo negativo e incluyen Serratia marcescens y Enterobacter aerogenes .
Se inocula un tubo lleno de caldo de fosfato de glucosa con un asa de transferencia estéril. El tubo se incuba a 35 °C (95 °F) durante 2 a 5 días. Después de la incubación, se transfieren 2,5 ml del medio a otro tubo. Se añaden cinco gotas del indicador de pH rojo de metilo a este tubo. El tubo se hace rodar suavemente entre las palmas de las manos para dispersar el rojo de metilo.
Los entéricos que posteriormente metabolizan el ácido pirúvico a otros ácidos reducen el pH del medio a 4,2. A este pH, el rojo de metilo se vuelve rojo, una prueba positiva. Los entéricos que posteriormente metabolizan el ácido pirúvico a productos finales neutros reducen el pH del medio a solo 6,0. A este pH, el rojo de metilo es amarillo, una prueba negativa.
