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C2C12

Miotubos C2C12 bajo microscopio óptico, aumento de 10x

C2C12 es una línea celular de mioblastos de ratón inmortalizada . La línea celular C2C12 es un subclón de mioblastos que fueron obtenidos originalmente por Yaffe y Saxel en el Instituto de Ciencias Weizmann en Israel en 1977. [1] Desarrolladas para estudios in vitro de mioblastos aislados de las interacciones complejas de condiciones in vivo , las células C2C12 son útiles en la investigación biomédica. [2] Estas células son capaces de proliferar rápidamente en condiciones de suero alto y diferenciarse en miotubos en condiciones de suero bajo. Los mioblastos mononucleados pueden fusionarse posteriormente para formar miotubos multinucleados en condiciones de suero bajo o inanición, lo que conduce a los precursores de las células musculares esqueléticas contráctiles en el proceso de miogénesis . [3] Las células C2C12 se utilizan para estudiar la diferenciación de mioblastos, osteoblastos y miogénesis, para expresar varias proteínas diana y para explorar vías bioquímicas mecanicistas.

Morfología

Las células C2C12 de tipo salvaje tienen una morfología de ramificación radial que consiste en fibras largas que se extienden en muchas direcciones. Las células C2C12 se pueden cultivar en una variedad de condiciones para inducir respuestas específicas de interés. Por ejemplo, con la ayuda de la alta tasa de diferenciación y la tasa de fusión de la línea celular, las plantillas de fibronectina se pueden microplacar en placas de Petri o matraces de cultivo celular para inducir patrones de crecimiento específicos, como el de las interacciones de las células del músculo esquelético con los componentes de la matriz extracelular . [4] La introducción de moléculas de adhesión puede alterar el patrón de crecimiento de las células C2C12 a una distribución longitudinal que exhibe polaridad. [5] Hay muchas formas de regular la forma de los mioblastos C2C12 genéticamente y ambientalmente, desde el estrés hasta la alteración del citoesqueleto y los factores de crecimiento. El andamiaje de las células C2C12 es particularmente importante para estudiar la regeneración del tejido muscular después de una lesión o después del desgaste tisular debido a una enfermedad o la rehabilitación en la UCI .

Usos en la investigación

Se ha demostrado que las células C2C12 incorporan eficazmente ADNc exógeno y ácidos nucleicos mediante transfección . En la investigación piloto realizada originalmente por Yaffe y Saxel, se obtuvieron C2C12 mediante el paso en serie de mioblastos cultivados del músculo del muslo de ratones C3H después de una lesión por aplastamiento. En su estudio, se cultivó un conjunto de células C2C12 a partir de mioblastos de ratón normales, que se cultivaron a partir de ratones C3H de dos meses de edad después de una lesión por aplastamiento. En dos días, las células normales se diferenciaron en mioblastos mononucleares con forma de huso. Después de cuatro días, se formaron redes de miotubos multinucleados y, unos días después, se pudieron observar sarcómeros y líneas Z. [6] Por el contrario, las células distróficas formaron fibras acortadas cubiertas de fibroblastos , un sello distintivo del desgaste muscular. [1]

Las células C2C12 demuestran un rápido desarrollo y maduración en células musculares esqueléticas funcionales o células musculares cardíacas , teniendo la capacidad de contraerse y generar fuerza. [6] La tasa de formación muscular a partir de células C2C12 puede ser controlada por la introducción de genes de pérdida de funciones vitales para la fusión de mioblastos y miogénesis. [7] Bajo condiciones necróticas, como el factor de necrosis tumoral alfa ( TNF-α ), se ha demostrado la pérdida directa de proteínas, particularmente la proteína de cadena pesada de miosina , en células musculares esqueléticas C2C12. [8] Las células C2C12 se utilizaron para dilucidar la replicación del cromosoma X inactivado (Xi) durante la fase S temprana del ciclo celular y está regulada epigenéticamente. [9] Las células C2C12 son especialmente convenientes para estudiar el ciclo celular debido a su alta tasa de división.

Referencias

  1. ^ ab Yaffe, David; Saxel, Ora (22 de diciembre de 1977). "Pasaje seriado y diferenciación de células miogénicas aisladas de músculo distrófico de ratón". Nature . 270 (5639): 725–727. Bibcode :1977Natur.270..725Y. doi :10.1038/270725a0. ISSN  0028-0836. PMID  563524. S2CID  4196110.
  2. ^ "Línea celular C2C12" . Consultado el 12 de julio de 2018 .
  3. ^ "Trabajando con la línea celular C2C12". Research in Myogenesis . 4 de febrero de 2012. Consultado el 3 de mayo de 2017 .
  4. ^ Bajaj, Piyush; Reddy, Bobby; Millet, Larry; Wei, Chunan; Zorlutuna, Pinar ; Bao, Gang; Bashir, Rashid (1 de septiembre de 2011). "Modelado de la diferenciación de mioblastos esqueléticos C2C12". Biología Integrativa . 3 (9): 897–909. doi :10.1039/c1ib00058f. ISSN  1757-9708. PMID  21842084.
  5. ^ Mermelstein, CS (5 de mayo de 2003). "Cambios en la forma celular, proteínas del citoesqueleto y sitios de adhesión de células cultivadas después de la quelación extracelular de Ca2+" (PDF) . Revista Brasileña de Investigación Médica y Biológica . 36 (8): 1111–1116. doi : 10.1590/s0100-879x2003000800018 . PMID  12886466.
  6. ^ ab McMahon, DK; Anderson, PA; Nassar, R.; Bunting, JB; Saba, Z.; Oakeley, AE; Malouf, NN (1 de junio de 1994). "Células C2C12: propiedades biofísicas, bioquímicas e inmunocitoquímicas". Revista estadounidense de fisiología. Fisiología celular . 266 (6): C1795–C1802. doi :10.1152/ajpcell.1994.266.6.c1795. ISSN  0363-6143. PMID  8023908.
  7. ^ Bi, Pengpeng; Ramirez-Martinez, Andres; Li, Hui; Cannavino, Jessica; McAnally, John R.; Shelton, John M.; Sánchez-Ortiz, Efrain; Bassel-Duby, Rhonda; Olson, Eric N. (21 de abril de 2017). "Control de la formación muscular por el micropéptido fusogénico myomixer". Science . 356 (6335): 323–327. Bibcode :2017Sci...356..323B. doi :10.1126/science.aam9361. ISSN  1095-9203. PMC 5502127 . PMID  28386024. 
  8. ^ Li, YP; Schwartz, RJ; Waddell, ID; Holloway, BR; Reid, MB (1 de julio de 1998). "Los miocitos del músculo esquelético sufren pérdida de proteínas y activación reactiva del NF-kappaB mediada por oxígeno en respuesta al factor de necrosis tumoral alfa". FASEB Journal . 12 (10): 871–880. doi : 10.1096/fasebj.12.10.871 . ISSN  0892-6638. PMID  9657527.
  9. ^ Casas-Delucchi, Corella S.; Brero, Alessandro; Rahn, Hans-Peter; Solovei, Irina; Wutz, Anton; Cremer, Thomas; Leonhardt, Heinrich; Cardoso, M. Cristina (1 de marzo de 2011). "La acetilación de histonas controla la dinámica de replicación del cromosoma X inactivo". Nature Communications . 2 : 222. Bibcode :2011NatCo...2..222C. doi :10.1038/ncomms1218. ISSN  2041-1723. PMC 3072080 . PMID  21364561. 

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