La tripsinización es el proceso de disociación celular utilizando tripsina , una enzima proteolítica que descompone las proteínas, para disociar las células adherentes del recipiente en el que se cultivan. Cuando se agrega al cultivo celular, la tripsina descompone las proteínas que permiten que las células se adhieran al vaso. La tripsinización se utiliza a menudo para pasar células a un nuevo vaso. Cuando se complete el proceso de tripsinización, las células estarán en suspensión y aparecerán redondeadas.
Con fines experimentales, las células suelen cultivarse en recipientes que adoptan la forma de matraces o platos de plástico. En dichos matraces, las células reciben un medio de crecimiento que comprende los nutrientes esenciales necesarios para la proliferación, y las células se adhieren al recipiente y entre sí a medida que crecen.
Este proceso de cultivo celular o cultivo de tejidos requiere un método para disociar las células del recipiente y entre sí. La tripsina, una enzima que se encuentra comúnmente en el tracto digestivo , se puede utilizar para "digerir" las proteínas que facilitan la adhesión al recipiente y entre las células.
Una vez que las células se han desprendido de su contenedor es necesario desactivar la tripsina, a menos que la tripsina sea sintética, ya que las proteínas de la superficie celular también se escindirán con el tiempo y esto afectará el funcionamiento celular. [1] El suero se puede utilizar para inactivar la tripsina, ya que contiene inhibidores de la proteasa. [2] Debido a la presencia de estos inhibidores, el suero debe eliminarse antes del tratamiento de un vaso de crecimiento con tripsina y no debe agregarse nuevamente al vaso de crecimiento hasta que las células se hayan desprendido de su superficie de crecimiento; este desprendimiento puede confirmarse visualmente. observación mediante un microscopio.
La tripsinización se utiliza a menudo para permitir el paso de células adherentes a un nuevo recipiente, la observación para experimentación o la reducción del grado de confluencia en un matraz de cultivo mediante la eliminación de un porcentaje de las células.