Diagrama de Hanes-Woolf

Gráfica de la cinética enzimática

Diagrama de Hanes de a/v frente a a para la cinética de Michaelis-Menten

En bioquímica , un diagrama de Hanes-Woolf , diagrama de Hanes o diagrama de contra ${\displaystyle a/v}$ ${\displaystyle a}$ es una representación gráfica de la cinética enzimática en la que se representa gráficamente la relación entre la concentración inicial del sustrato y la velocidad de reacción en contra de . Se basa en la reorganización de la ecuación de Michaelis-Menten que se muestra a continuación: ${\displaystyle a}$ ${\displaystyle v}$ ${\displaystyle a}$

${\displaystyle {a \over v}={a \over V}+{K_{\mathrm {m} } \over V}}$

donde es la constante de Michaelis y es la tasa límite. ^[1] ${\displaystyle K_{\mathrm {m} }}$ ${\displaystyle V}$

JBS Haldane afirmó, reiterando lo que él y KG Stern habían escrito en su libro, ^[2] que esta reorganización se debió a Barnet Woolf . ^[3] Sin embargo, fue solo una de las tres transformaciones introducidas por Woolf. Fue publicada por primera vez por CS Hanes, aunque no la utilizó como gráfico. ^[4] Hanes señaló que el uso de la regresión lineal para determinar los parámetros cinéticos a partir de este tipo de transformación lineal genera el mejor ajuste entre los valores observados y calculados de , en lugar de . ^{[4] : 1415} ${\displaystyle 1/v}$ ${\displaystyle v}$

Partiendo de la ecuación de Michaelis-Menten:

${\displaystyle v={{Va} \over {K_{\mathrm {m} }+a}}}$

Podemos tomar los recíprocos de ambos lados de la ecuación para obtener la ecuación subyacente al gráfico de Lineweaver-Burk :

${\displaystyle {1 \over v}={1 \over V}+{K_{\mathrm {m} } \over V}\cdot {1 \over a}}$

que se puede multiplicar en ambos lados por para dar ${\displaystyle {a}}$

${\displaystyle {a \over v}={1 \over V}\cdot a+{K_{\mathrm {m} } \over V}}$

Por lo tanto, en ausencia de datos de error experimental, un gráfico de contra produce una línea recta de pendiente , una intersección en la ordenada de y una intersección en la abscisa de . ${\displaystyle {a/v}}$ ${\displaystyle {a}}$ ${\displaystyle 1/V}$ ${\displaystyle {K_{\mathrm {m} }/V}}$ ${\displaystyle -K_{\mathrm {m} }}$

Al igual que otras técnicas que linealizan la ecuación de Michaelis-Menten, el gráfico de Hanes-Woolf se utilizó históricamente para la determinación rápida de los parámetros cinéticos , y , pero ha sido reemplazado en gran medida por métodos de regresión no lineal que son significativamente más precisos y ya no son inaccesibles desde el punto de vista computacional. Sin embargo, sigue siendo útil como un medio para presentar datos gráficamente. ${\displaystyle K_{\mathrm {m} }}$ ${\displaystyle V}$ ${\displaystyle K_{\mathrm {m} }/V}$

Véase también

• Cinética de Michaelis-Menten
• Diagrama de Lineweaver-Burk
• El complot de Eadie-Hofstee
• Trazado lineal directo

Referencias

1. El término "velocidad máxima" se utiliza a menudo, pero la IUBMB no lo recomienda; véase Cornish-Bowden, A (2014). "Recomendaciones actuales de la IUBMB sobre nomenclatura y cinética de enzimas". Persp. Sci . 1 : 74–87. doi :10.1016/j.pisc.2014.02.006.
2. Haldane, John Burdon Sanderson ; Popa, Kurt Günter (1932). Allgemeine Chemie der Enzyme . Wissenschaftliche Forschungsberichte, Naturwissenschaftliche Reihe, herausgegeben von Dr. Raphael Eduard Liesegang . vol. 28. Dresde y Leipzig: Theodor Steinkopff. págs. 119-120. OCLC  964209806.
3. Haldane, John Burdon Sanderson (1957). "Métodos gráficos en química enzimática". Nature . 179 (4564): 832–832. Código Bibliográfico :1957Natur.179R.832H. doi : 10.1038/179832b0 . S2CID  4162570.
4. Hanes, Charles Samuel (1932). "Estudios sobre amilasas vegetales: el efecto de la concentración de almidón sobre la velocidad de hidrólisis por la amilasa de la cebada germinada". Revista bioquímica . 26 (5): 1406–1421. doi :10.1042/bj0261406. PMC 1261052 . PMID  16744959.