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COLUMNA (biología molecular)

SPINE significa experimento de interacción estreptococo-proteína . SPINE es una poderosa herramienta para detectar interacciones proteína-proteína in vivo. La proteína cebo debe expresarse con una etiqueta Strep en condiciones en las que los posibles socios de interacción presumiblemente estén presentes en las células. La adición de formaldehído vincula la proteína del cebo con sus posibles socios de interacción. La proteína cebo junto con sus posibles compañeros de interacción se pueden aislar utilizando una columna Strep-Tactin Sepharose. Los enlaces cruzados entre la proteína del cebo y el posible compañero de interacción se pueden eliminar calentando las muestras en tampón Laemmli. Finalmente, el compañero de interacción copurificado puede separarse mediante SDS PAGE e identificarse mediante espectrometría de masas.


Referencias