Medios complejos artificiales
RPMI 1640 , simplemente conocido como medio RPMI , es un medio de cultivo celular comúnmente utilizado para cultivar células de mamíferos . [1] RPMI 1640 fue desarrollado por George E. Moore, Robert E. Gerner y H. Addison Franklin en 1966 en Roswell Park Comprehensive Cancer Center (antes conocido como Roswell Park Memorial Institute), de donde deriva su nombre. [2] Una modificación del medio 5A de McCoy (o RPMI 1630), se formuló originalmente para soportar células linfoblastoides en cultivos en suspensión, pero también puede soportar una amplia variedad de células adherentes.
Fue desarrollado originalmente para cultivar células leucémicas humanas. Con el paso de los años, la formulación original fue modificada y refinada por investigadores y proveedores comerciales para mejorar su capacidad de soportar el crecimiento de muchos tipos de células. Este medio contiene una gran cantidad de fosfato , aminoácidos y vitaminas . RPMI 1640 utiliza un sistema de tampón de bicarbonato y requiere una atmósfera de 5–10% de CO2 para mantener el pH fisiológico . Normalmente, el medio no contiene proteínas ni factores de crecimiento, por lo que comúnmente se suplementa con un 10% de suero bovino fetal . Complementado adecuadamente con suero o un reemplazo de suero adecuado, RPMI 1640 permite el cultivo de muchos tipos de células, especialmente linfocitos humanos, células Jurkat , células HeLa , células de médula ósea, hibridomas y carcinomas .
Composición
Existen muchas formulaciones diferentes. Por lo general, un litro de RPMI 1640 contiene: [2]
- Glucosa (2 g)
- Un indicador de pH ( rojo fenol , 5 mg)
- Sales (6 g de cloruro de sodio, 2 g de bicarbonato de sodio, 1,512 g de fosfato disódico, 400 mg de cloruro de potasio, 100 mg de sulfato de magnesio y 100 mg de nitrato de calcio)
- Aminoácidos (300 mg de glutamina; 200 mg de arginina; 50 mg de asparagina, cistina, leucina e isoleucina; 40 mg de clorhidrato de lisina; 30 mg de serina; 20 mg de ácido aspártico, ácido glutámico, hidroxiprolina, prolina, treonina, tirosina y valina; 15 mg de histidina, metionina y fenilalanina; 10 mg de glicina; 5 mg de triptófano; y 1 mg de glutatión reducido)
- Vitaminas (35 mg de i -inositol; 3 mg de cloruro de colina; 1 mg de ácido para -aminobenzoico, ácido fólico, nicotinamida, clorhidrato de piridoxina y clorhidrato de tiamina; 0,25 mg de pantotenato de calcio; 0,2 mg de biotina y riboflavina; y 0,005 mg de cianocobalamina)
Referencias
- ^ Atlas RM, Snyder JW (2006). Manual de medios para microbiología clínica (2.ª ed.). Boca Raton, Florida: CRC Press. pág. 427.
- ^ ab Moore GE, Gerner RE, Franklin HA (1967). "Cultivo de leucocitos humanos normales". JAMA . 199 (8): 519–524. doi :10.1001/jama.199.8.519. PMID 4960081.
Enlaces externos
- http://www.bioind.com/RPMI1640
- http://www.sigmaaldrich.com/Area_of_Interest/Life_Science/Cell_Culture/Product_Lines/Classic_Media___Salts/RPMI_Media.html
- http://www.invitrogen.com/site/us/en/home/Products-and-Services/Applications/Cell-Culture/Mammalian-Cell-Culture/Classical_Media/RPMI.html
- http://www.captivatebio.com/rpmi-1640-medium.html