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Tubo indicador de crecimiento de micobacterias

Muestras de tubos indicadores de crecimiento de micobacterias (MGIT) expuestas a luz ultravioleta. La emisión de fluorescencia naranja indica la presencia de micobacterias. Las muestras sin fluorescencia en esta imagen aún reflejan algo de luz de las demás.

El tubo indicador de crecimiento de micobacterias (MGIT) está diseñado para el cultivo, la detección y la recuperación de micobacterias . El tubo indicador de crecimiento de micobacterias MGIT contiene 7 ml de caldo base 7H9 de Middlebrook modificado . El medio completo, con enriquecimiento de OADC y mezcla de antibióticos PANTA , es uno de los medios líquidos más utilizados para el cultivo de micobacterias.

Todos los tipos de muestras clínicas, tanto pulmonares como extrapulmonares (excepto sangre y orina ), pueden procesarse para el aislamiento primario en el tubo MGIT utilizando métodos convencionales. Una vez inoculada la muestra procesada, el tubo MGIT debe controlarse de forma continua, ya sea de forma manual o con instrumentos automatizados, hasta que se obtenga un resultado positivo o hasta que finalice el protocolo de prueba.

Principios del procedimiento

En el fondo de tubos de 16 × 100 mm con fondo redondo se encuentra incrustado un compuesto fluorescente en silicona . El compuesto fluorescente es sensible a la presencia de oxígeno disuelto en el caldo. Inicialmente, la gran cantidad de oxígeno disuelto extingue las emisiones del compuesto y se puede detectar poca fluorescencia. Más tarde, los microorganismos que respiran activamente consumen el oxígeno y permiten detectar la fluorescencia. [ cita requerida ]

Los tubos se llenan con muestras en el caldo y se incuban continuamente a 37 °C. Se monitorean los tubos para determinar si la fluorescencia aumenta y así determinar si el tubo es positivo para el instrumento; es decir, si la muestra de prueba contiene organismos viables. La fluorescencia se puede registrar mediante instrumentos automatizados como el sistema BACTEC MGIT 960 de Becton Dickinson , o manualmente utilizando el lector de fluorescencia BD BACTEC microMGIT o una lámpara de Wood u otra fuente de luz ultravioleta de onda larga . [1]

Instrumentos

Sistema BACTEC MGIT 960

Este instrumento es fabricado por Becton Dickinson (BD). Está especialmente diseñado para alojar tubos indicadores de crecimiento de micobacterias (MGIT) e incubarlos a 37 °C. El instrumento escanea el MGIT cada 60 minutos para detectar un aumento de la fluorescencia. El análisis de la fluorescencia se utiliza para determinar si el tubo es positivo para el instrumento; es decir, la muestra de prueba contiene organismos viables. Un tubo positivo para el instrumento contiene aproximadamente de 10 5 a 10 6 unidades formadoras de colonias por mililitro (UFC/ml). Los tubos de cultivo que permanecen negativos durante un mínimo de 42 días (hasta 56 días) y que no muestran signos visibles de positividad se retiran del instrumento como negativos y se descartan. [1] Su utilidad ha sido evaluada en la literatura científica . [2] [3] [4]

Referencias

  1. ^ ab Siddiqi, Salman H.; Sabine Rüsch-Gerdes (2006). Manual de procedimientos para el sistema BACTEC MGIT 960 TB .
  2. ^ "Uso de BACTEC MGIT 960 para la recuperación de micobacterias a partir de muestras clínicas: estudio multicéntrico" Enrico Tortoli, Paola Cichero, Claudio Piersimoni, M. Tullia Simonetti, Giampietro Gesu y Domenico Nista Journal of Clinical Microbiology , noviembre de 1999, pág. 3578-3582, vol. 37, n.º 11 [1]
  3. ^ "Evaluación del sistema automatizado BACTEC MGIT 960 para probar la susceptibilidad de Mycobacterium tuberculosis a cuatro fármacos antituberculosos principales: comparación con el método radiométrico BACTEC 460TB y el método de proporción en placa de agar" Enrico Tortoli, Marta Benedetti, Alessandra Fontanelli y M. Tullia Simonetti Journal of Clinical Microbiology , febrero de 2002, pág. 607-610, vol. 40, n.º 2 doi :10.1128/JCM.40.2.607-610.2002
  4. ^ "Evaluación del sistema totalmente automatizado Bactec MGIT 960 para la prueba de susceptibilidad de Mycobacterium tuberculosis a fármacos de primera línea: un estudio multicéntrico" Fanourios Kontosa, Maria Maniatia, Christos Costopoulosb, Zoe Gittic, Stavroula Nicolaoub, Efymia Petinakia, Spyridoula Anagnostoub, Ioannis Tselentisc y Antonios N. Maniatis Journal of Microbiological Methods Volumen 56, Número 2, febrero de 2004, páginas 291–294 doi :10.1016/j.mimet.2003.10.015