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Grabación de un solo sensillum

El registro de sensilo único (SSR, por sus siglas en inglés) es una forma de electrofisiología extracelular. Esta técnica mide los potenciales de acción generados por las neuronas sensoriales olfativas (OSN, por sus siglas en inglés) a través de una sola sensila en las antenas de los insectos. [1] Estas sensilas son estructuras similares a pelos que sobresalen a través de la cutícula , así como de varias otras células auxiliares y sensoriales. [2]

Este método se utiliza a menudo si se desean resultados más cuantitativos, ya que las grabaciones producidas tienen la capacidad de probar y demostrar la sensibilidad y selectividad de las OSN individuales, lo que proporciona una técnica para mapear la receptividad de las proteínas receptoras olfativas dentro de las OSN. También se suele combinar con otras técnicas, como la cromatografía de gases , la incisión de sensilio, la difusión o la microinyección . [1]

Algunas aplicaciones de esta técnica incluyen probar la sensibilidad a las feromonas , probar las reacciones a compuestos volátiles en el medio ambiente y la reactividad a señales químicas de otros organismos.

Métodos

El insecto de prueba se coloca dentro de la punta de una pipeta, con la cabeza ligeramente sobresaliendo de la punta. El objetivo principal de esto es sujetar al insecto y evitar que cualquier movimiento interfiera con la calidad de la grabación. La punta de la pipeta que contiene el insecto se fija a un portaobjetos de microscopio mirando hacia arriba, luego se fijan las antenas utilizando un microcapilar de vidrio, cera o cinta adhesiva; manipulándolas hasta que se obtenga la orientación deseada. [3]

Para realizar el registro, se introduce un electrodo de tierra en la zona más cercana a la sensila (normalmente el ojo) . A continuación, se inserta otro en la cutícula de la sensila. Estos electrodos suelen estar hechos de tungsteno o vidrio y se afilan químicamente para garantizar una penetración precisa en las zonas de destino. El contacto inicial suele dar lugar a un aumento del ruido de la señal, que actúa como señal de que el insecto preparado está vivo y correctamente conectado a tierra. En este punto, los potenciales de acción deberían ser fáciles de distinguir del ruido de fondo; sin embargo, si la intensidad de la señal es débil, se pueden sustituir los electrodos. [1] Alternativamente, se pueden realizar pruebas utilizando diferentes sensilas. [1]

Véase también

Referencias

  1. ^ abcd Olsson, Shannon B.; Hansson, Bill S. (2013), Touhara, Kazushige (ed.), "Electroantenograma y registro de un solo sensilo en antenas de insectos", Señalización con feromonas: métodos y protocolos , Métodos en biología molecular, vol. 1068, Totowa, NJ: Humana Press, págs. 157-177, doi :10.1007/978-1-62703-619-1_11, ISBN 978-1-62703-619-1, PMID  24014360 , consultado el 10 de marzo de 2022
  2. ^ Keil, Thomas A.; Steinbrecht, R. Alexander (1984), King, Robert C.; Akai, Hiromu (eds.), "Sensilla mecanosensitiva y olfativa de los insectos", Insect Ultrastructure: Volumen 2 , Boston, MA: Springer US, págs. 477–516, doi :10.1007/978-1-4613-2715-8_13, ISBN 978-1-4613-2715-8, consultado el 10 de marzo de 2022
  3. ^ Gonzalez, Francisco; Witzgall, Peter; Walker, William B. (2016). "Protocolo para la expresión heteróloga de receptores de olores de insectos en Drosophila". Frontiers in Ecology and Evolution . 4 . doi : 10.3389/fevo.2016.00024 . ISSN  2296-701X.