La prueba Etest (anteriormente conocida como prueba del Epsilómetro ) es una forma de determinar la sensibilidad a los antimicrobianos colocando una tira impregnada con antimicrobianos en una placa de agar . Una cepa de bacteria u hongo no crecerá cerca de una concentración de antibiótico o antimicótico si es sensible. Para algunas combinaciones de microbios y antimicrobianos, los resultados se pueden utilizar para determinar una concentración inhibitoria mínima (CIM). La prueba Etest es un sistema patentado fabricado por bioMérieux . Es una prueba de laboratorio que se utiliza en entornos de atención médica para ayudar a guiar a los médicos al indicar qué concentración de antimicrobiano podría usarse con éxito para tratar las infecciones de los pacientes. [1]
Etest es una técnica cuantitativa para determinar la sensibilidad a los antibióticos y la concentración inhibitoria mínima (en μg/mL) de algunas bacterias , incluidas las bacterias aeróbicas gramnegativas y grampositivas como Enterobacteriaceae , [2] Pseudomonas , [2] [3] [4] Burkholderia , [2] [5] Staphylococcus , [6] y Enterococcus [7] y bacterias exigentes, como anaerobios, N. gonorrhoeae , S. pneumoniae , Streptococcus y Haemophilius . [1] También se puede utilizar para determinar las CMI contra ciertos hongos. [8] [9]
Etest es una tira reactiva de plástico no porosa preparada previamente con un gradiente predefinido de antibiótico, que cubre un rango de concentración continuo. Se aplica a la superficie de una placa de agar inoculada con la cepa de prueba, donde se libera el gradiente antimicrobiano del portador de plástico al agar para formar un gradiente estable y continuo debajo y cerca de la tira.
El tiempo que tarda una placa en estar lista depende de la bacteria que se esté analizando y de las condiciones de la placa de agar. El gradiente de Etest predefinido permanece estable durante al menos 18 a 24 horas; es decir, un período que cubre los momentos críticos de muchas especies de organismos exigentes y no exigentes.
Después de la prueba, el crecimiento bacteriano se hace visible después de la incubación y se ve una elipse de inhibición simétrica centrada a lo largo de la tira. El valor de MIC se lee en la escala en términos de μg/mL donde el borde de la elipse interseca la tira. Después del período de incubación requerido, el valor inhibitorio mínimo se lee donde el borde de la elipse de inhibición interseca el lado de la tira. No se debe leer la placa si el cultivo parece mixto o si el césped de crecimiento es demasiado claro o demasiado denso.
Los puntos finales de MIC de Etest suelen ser claros, aunque se pueden observar diferentes patrones de crecimiento/inhibición según el antimicótico o antibiótico utilizado. [9]
Etest se puede utilizar con muchos tipos diferentes de medio de agar AST, siempre que el medio favorezca el crecimiento adecuado del organismo de prueba y no interfiera con la actividad del agente antimicrobiano. Sin embargo, para maximizar la reproducibilidad, el medio elegido debe cumplir con los requisitos básicos de un medio de prueba de susceptibilidad. Se recomiendan los siguientes medios AST para su uso con Etest: [ cita requerida ]
Estos medios pueden requerir nutrientes suplementarios para obtener un crecimiento mejorado de organismos nutricionalmente exigentes como neumococos, estreptococos, Abiotrophia , Haemophilus , gonococos, meningococos y Campylobacter . En general, las recomendaciones de medios del Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI) y del European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing (EUCAST) se consideran apropiadas para Etest.
Existen productos Etest para más de 100 agentes antimicrobianos, incluidos antibióticos, agentes antifúngicos y agentes antimicobacterianos. Además, existen productos Etest específicos para la detección de mecanismos de resistencia específicos [p. ej., ESBL (beta-lactamasa de espectro extendido), MBL (beta-lactamasa metaloide), beta-lactamasa AmpC y VISA/h VISA].
Etest ha sido aprobado por la FDA y marcado CE para muchos organismos comparándolo con los métodos de referencia de dilución de caldo/agar convencionales y ha demostrado tener una excelente correlación.
La familia de instrumentos Etest está diseñada para simplificar el uso diario de Etest. Simplex C76, Nema C88 y Retro C80 son fáciles de usar, reducen la fatiga del operador, ahorran tiempo y mejoran la calidad de los resultados al aumentar la reproducibilidad. Etest y los instrumentos relacionados ofrecen uno de los métodos más eficientes para generar valores de CMI a escala en 15 diluciones de duplicación para pruebas de susceptibilidad de una amplia gama de combinaciones de medicamentos y microorganismos, incluidos organismos exigentes.
La tira Etest se describió por primera vez en 1988 y fue introducida comercialmente en 1991 por AB BIODISK. bioMérieux adquirió AB BIODISK en 2008 y continúa fabricando y comercializando esta gama de productos bajo la marca Etest.
Durante la década de 1950, Hans Ericsson (profesor de microbiología en el Hospital Karolinska y el Instituto Karolinska de Estocolmo), fundador científico de AB BIODISK, desarrolló un método para estandarizar la prueba de difusión en disco y mejorar su reproducibilidad y fiabilidad para las predicciones de susceptibilidad clínica. Los tamaños de las zonas de inhibición de los resultados de la prueba en disco se compararon con los valores de concentración inhibitoria mínima (CIM) basados en el procedimiento de dilución en agar de referencia . A continuación, se evaluó la correlación entre los tamaños de las zonas y los valores de CIM mediante un análisis de regresión y se utilizaron líneas de regresión para extrapolar los límites interpretativos de las zonas que correspondían a los valores de punto de corte de la CIM que definían los resultados categóricos de susceptibilidad, intermedios y resistencia.
Etest se presentó por primera vez en la Conferencia Interscience sobre Agentes Antimicrobianos y Quimioterapia (ICAAC) en Los Ángeles en 1988 como un concepto de gradiente novedoso para las determinaciones de CMI. En septiembre de 1991, Etest se lanzó a nivel mundial como un producto de CMI después de recibir la autorización de la Administración de Alimentos y Medicamentos de los EE. UU. (FDA).
