El elemento desestabilizador del bucle madre del factor G-CSF (SLDE) es un elemento de ARN secretado por fibroblastos y células endoteliales en respuesta a los mediadores inflamatorios interleucina-1 (IL-1) y factor de necrosis tumoral alfa y por macrófagos activados . La síntesis de G-CSF está regulada tanto transcripcionalmente como mediante el control de la estabilidad del ARNm . En células no estimuladas, el ARNm del G-CSF es inestable pero se estabiliza en respuesta a la IL-1 o al factor de necrosis tumoral alfa, y también en el caso de monocitos y macrófagos, en respuesta al lipopolisacárido . Es probable que la presencia de SLDE en el ARNm de G-CSF contribuya a la especificidad de la regulación del ARNm de G-CSF y aumente la tasa de acortamiento de la cola poli(A) . [1]
Los elementos ricos en adenilato-uridilato (AURE) están presentes en otros ARNm de citocinas, pero el SLDE es el elemento más importante que estabiliza el ARNm de G-CSF en respuesta a la IL-1 o al factor de necrosis tumoral alfa. [2] Además, hay elementos desestabilizadores similares al SLDE que se encuentran en la IL-2 y la IL-6 . La 3'-UTR del ARNm de G-CSF contiene un elemento desestabilizador que es insensible al ionóforo de calcio , por lo que el SLDE regula el ARNm de G-CSF. Los AUDE no funcionan en las células del carcinoma de vejiga 5637, pero el SLDE sí. Los dos elementos desestabilizadores, SLDE y AURE, proporcionan múltiples mecanismos para regular la expresión de citocinas.
Los neutrófilos , son el tipo de granulocitos más abundante y se encargan de liderar la primera respuesta del sistema inmunológico frente a los invasores. El factor estimulante de colonias de granulocitos (G-CSF) es una glicoproteína que estimula la proliferación de células progenitoras de neutrófilos y conduce a la maduración de los neutrófilos. Los monocitos y los macrófagos son las células que secretan G-CSF, pero se ha descubierto que las células endoteliales , los fibroblastos y las células del estroma de la médula ósea también secretan la glicoproteína. La expresión de la glicoproteína G-CSF es compleja y tiene regulación tanto de transcripción como de postranscripción. Dos tipos específicos de elementos reguladores están presentes en la región 3' no traducida (3'UTR) del ARNm de G-CSF . Estos elementos se conocen como elementos ricos en adenilato-uridilato (AURE) y elemento desestabilizador del vástago (SLDE). Se ha demostrado que son elementos desestabilizadores del ARNm de G-CSF. Por otro lado, la estabilidad del ARNm está regulada por la proteína quinasa activada por mitógenos p38 (MAPK) y se ha demostrado que esta enzima fosforilante está unida a los AURE en la 3'UTR.
SB203580 inhibe específicamente la actividad catalítica de p38 MAPK uniéndose competitivamente al sitio activo donde se supone que se une el ATP y se utiliza para investigar el papel de p38 MAPK en las células. [3] SB203580 amplificó el aumento inducido por lipopolisacáridos en los niveles de ARNm de G-CSF en macrófagos derivados de la médula ósea de ratón y en macrófagos humanos THP-1. Al mostrar que la descomposición del ARNm de G-CSF, en presencia de actinomicina D , fue más lenta en las células tratadas con SB203580. SB203580 aumentó la estabilidad del ARNm de G-CSF. SLDE es esencial para el aumento inducido por SB203580 en la estabilidad del ARNm.