El azul de toluidina , también conocido como TBO o cloruro de tolonio ( DCI ), es un colorante catiónico (básico) azul utilizado en histología (como tinción de azul de toluidina ) y, a veces, clínicamente.
La solución de azul de toluidina se utiliza para analizar la lignina , una molécula orgánica compleja que se une a las fibras de celulosa y fortalece y endurece las paredes celulares de las plantas . Una prueba de azul de toluidina positiva hace que la solución pase de azul a azul verdoso. [1] Se puede realizar una prueba similar con una solución de floroglucinol - HCl , que se vuelve roja.
El azul de toluidina es un colorante metacromático de tiazina básico con alta afinidad por los componentes ácidos del tejido. [2] Tiñe los ácidos nucleicos de azul y los polisacáridos de púrpura y también aumenta la nitidez de las imágenes de portaobjetos de histología. Es especialmente útil hoy en día para teñir cromosomas en tejidos vegetales o animales, como reemplazo de la tinción de aceto-orceína .
El azul de toluidina se utiliza a menudo para identificar los mastocitos , en virtud de la heparina en sus gránulos citoplasmáticos . [3] También se utiliza para teñir proteoglicanos y glicosaminoglicanos en tejidos como el cartílago. Los carbohidratos macromoleculares fuertemente ácidos de los mastocitos y el cartílago se tiñen de rojo con el colorante azul, un fenómeno llamado metacromasia .
Las soluciones alcalinas de azul de toluidina se utilizan comúnmente para teñir secciones semidelgadas (de 0,5 a 1 μm) de tejido embebido en resina. A un pH alto (alrededor de 10), el colorante se une a los ácidos nucleicos y a todas las proteínas. Aunque todo el tejido se tiñe, los detalles estructurales son claramente visibles debido a la delgadez de las secciones. Las secciones semidelgadas se utilizan junto con secciones ultradelgadas examinadas mediante microscopía electrónica .
El azul de toluidina también se utiliza habitualmente para teñir secciones congeladas (análisis microscópico rápido de una muestra). Debido a que el tiempo es esencial para una sección congelada, el azul de toluidina permite teñir y revisar la sección congelada en 10 a 20 segundos. [4] El otro método de tinción para secciones congeladas (H&E rápido) demora aproximadamente entre 60 y 90 segundos.
Los resultados dependen de los órganos estudiados: [5]
Se utiliza en exámenes forenses, [6] patología renal [7] y neuropatología .
Los cirujanos a veces utilizan el tinte para ayudar a resaltar áreas de displasia mucosa (que absorben preferentemente el tinte en comparación con el tejido normal) en lesiones premalignas (por ejemplo, leucoplasia ). [8] Esto se puede utilizar para elegir el mejor sitio de la lesión para realizar la biopsia , o durante la cirugía para extirpar la lesión y decidir si se debe eliminar más tejido de los márgenes del defecto de escisión o dejarlo atrás.