Un inmunoensayo de donante de enzima clonado ( CEDIA ) es un inmunoensayo enzimático homogéneo competitivo . [1] Este ensayo utiliza dos fragmentos componentes de una enzima que son individualmente inactivos. Bajo las condiciones adecuadas en solución, estos fragmentos pueden reensamblarse espontáneamente para formar la enzima activa. Para su uso en ensayos bioquímicos, uno de los fragmentos de enzima se une a un analito de interés. El conjugado analito-fragmento de enzima aún puede reensamblarse con el otro fragmento de enzima para formar una enzima activa. Sin embargo, no puede hacer esto si el analito está unido a un anticuerpo.
Para determinar la cantidad de analito en una muestra, se debe agregar una alícuota de muestra a una solución que contiene un conjugado de enzima-fragmento-analito, el otro fragmento de enzima, un anticuerpo dirigido contra el analito y un sustrato para la reacción enzimática. La competencia por el anticuerpo ocurre entre el analito en la muestra y el conjugado de enzima-fragmento-analito. Altas concentraciones de analito en la muestra hacen que una cantidad relativamente pequeña del conjugado de enzima-fragmento-analito no pueda formar enzima activa y, por lo tanto, una actividad enzimática alta. Por el contrario, bajas concentraciones de analito en la muestra hacen que una cantidad relativamente grande del conjugado de enzima-fragmento-analito no pueda formar enzimas activas y, por lo tanto, una actividad enzimática baja.