El azul de bromofenol (3′,3″,5′,5″-tetrabromofenolsulfonftaleína, BPB), [2] albutest [3] se utiliza como indicador de pH , marcador de color electroforético y colorante. Se puede preparar añadiendo lentamente un exceso de bromo a una solución caliente de fenolsulfonftaleína en ácido acético glacial. [4]
Como indicador ácido-base, su rango útil se encuentra entre pH 3,0 y 4,6. Cambia de amarillo a pH 3,0 a azul a pH 4,6; esta reacción es reversible. [5] El azul de bromofenol está estructuralmente relacionado con la fenolftaleína (un indicador popular).
El bromofenol también se utiliza como marcador de color para controlar el proceso de electroforesis en gel de agarosa y electroforesis en gel de poliacrilamida . Dado que el azul de bromofenol lleva una ligera carga negativa a pH moderado, migrará en la misma dirección que el ADN o la proteína en un gel; la velocidad a la que migra varía según la densidad del gel y la composición del tampón , pero en un gel de agarosa al 1% típico en un tampón TAE 1X o un tampón TBE , el azul de bromofenol migra a la misma velocidad que un fragmento de ADN de unos 300 pares de bases , en agarosa al 2% como 150 pb. El xileno cianol y el naranja G también se pueden utilizar para este propósito. [6]
El azul de bromofenol también se utiliza como colorante. A pH neutro, el colorante absorbe la luz roja con mayor fuerza y transmite la luz azul. (Su absorbancia máxima es de 590 nm a un pH básico de 12). Las soluciones del colorante, por lo tanto, son azules. A pH bajo, el colorante absorbe la luz ultravioleta y azul con mayor fuerza y aparece amarillo en solución. En solución a pH 3,6 (en la mitad del rango de transición de este indicador de pH) obtenido por disolución en agua sin ningún ajuste de pH, el azul de bromofenol tiene un color rojo verdoso característico, donde el color aparente cambia dependiendo de la concentración y/o la longitud del camino a través del cual se observa la solución. Este fenómeno se llama color dicromático . [7] El azul de bromofenol es la sustancia con el valor más alto conocido del índice de dicromaticidad de Kreft . [8] Esto significa que tiene el mayor cambio en el tono de color , cuando el espesor o la concentración de la muestra observada aumenta o disminuye.