La 1-etil-3-(3-dimetilaminopropil)carbodiimida ( EDC , EDAC o EDCI ) es una carbodiimida soluble en agua que generalmente se maneja como clorhidrato . [1]
Se emplea típicamente en el rango de pH de 4.0-6.0 . Se utiliza generalmente como un agente activador de carboxilo para el acoplamiento de aminas primarias para producir enlaces amida. Mientras que otras carbodiimidas como diciclohexilcarbodiimida (DCC) o diisopropilcarbodiimida (DIC) también se emplean para este propósito, EDC tiene la ventaja de que el subproducto de urea formado (a menudo difícil de eliminar en el caso de DCC o DIC) se puede lavar del producto amida usando ácido diluido. Además, EDC también se puede utilizar para activar grupos fosfato para formar fosfomonoésteres y fosfodiésteres. Los usos comunes para esta carbodiimida incluyen síntesis de péptidos , reticulación de proteínas a ácidos nucleicos , pero también en la preparación de inmunoconjugados . EDC se utiliza a menudo en combinación con N -hidroxisuccinimida (NHS) para la inmovilización de grandes biomoléculas . Trabajos recientes también han utilizado EDC para evaluar el estado estructural de las nucleobases de uracilo en el ARN. [2] [3]
Preparación
El EDC está disponible comercialmente. Se puede preparar mediante la unión de isocianato de etilo a N , N -dimetilpropano-1,3-diamina para dar una urea , seguida de una reacción de deshidratación mediada por TsCl y TEA : [4]
Mecanismo
El EDC acopla aminas primarias y otros nucleófilos [5] a ácidos carboxílicos creando un grupo saliente de éster activado. Primero, el carbonilo del ácido ataca la carbodiimida del EDC y hay una transferencia de protones posterior. La amina primaria ataca luego al carbono carbonílico del ácido que forma un intermedio tetraédrico antes de colapsar y descargar el subproducto urea. Se obtiene la amida deseada [6] .
^ Richard S. Pottorf, Peter Szeto (2001). "Clorhidrato de 1-etil-3-(3'-dimetilaminopropil)carbodiimida". Enciclopedia E-EROS de reactivos para síntesis orgánica . doi :10.1002/047084289X.re062.
^ Mitchell, D; Renda, A; Douds, C; Babitzke, P; Assmann, S; Bevilacqua, P (2019). "Sondeo estructural de ARN in vivo del emparejamiento de bases de uracilo y guanina mediante 1-etil-3- (3-dimetilaminopropil) carbodiimida (EDC)". ARN . 25 (1): 147-157. doi : 10.1261/rna.067868.118 . PMC 6298566 . PMID 30341176.
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^ "Química de reticulantes de carbodiimida - EE. UU." www.thermofisher.com . Consultado el 10 de mayo de 2019 .
^ OCDE (2010). Prueba n.º 429: Sensibilización cutánea: ensayo de ganglio linfático local. París: Organización para la Cooperación y el Desarrollo Económicos.
^ Graham, Jessica C.; Trejo-Martin, Alejandra; Chilton, Martyn L.; Kostal, Jakub; Bercu, Joel; Beutner, Gregory L.; Bruen, Uma S.; Dolan, David G.; Gomez, Stephen; Hillegass, Jedd; Nicolette, John; Schmitz, Matthew (20 de junio de 2022). "Una evaluación de los riesgos para la salud ocupacional de los acopladores de péptidos". Investigación química en toxicología . 35 (6): 1011–1022. doi :10.1021/acs.chemrestox.2c00031. ISSN 0893-228X. PMC 9214767 . PMID 35532537.
^ Sperry, Jeffrey B.; Minteer, Christopher J.; Tao, JingYa; Johnson, Rebecca; Duzguner, Remzi; Hawksworth, Michael; Oke, Samantha; Richardson, Paul F.; Barnhart, Richard; Bill, David R.; Giusto, Robert A.; Weaver, John D. (21 de septiembre de 2018). "Evaluación de la estabilidad térmica de reactivos de acoplamiento de péptidos comúnmente utilizados en la fabricación farmacéutica". Investigación y desarrollo de procesos orgánicos . 22 (9): 1262–1275. doi :10.1021/acs.oprd.8b00193. ISSN 1083-6160.
Lectura adicional
López-Alonso, JP; Diez-Garcia, F; Font, J; Ribó, M; Vilanova, M; Scholtz, JM; González, C; Vottariello, F; Gotte, G; Libonati, M; Laurents, DV (2009). "La EDC de carbodiimida induce enlaces cruzados que estabilizan el dímero C de la ARNasa A contra la disociación: los aductos de EDC pueden afectar la carga neta, la conformación y la actividad de la proteína". Química de bioconjugados . 20 (8): 1459–1473. doi :10.1021/bc9001486. PMID 19606852.
Nakajima, N; Ikada, Y (1995). "Mecanismo de formación de amida por carbodiimida para bioconjugación en medios acuosos". Química de bioconjugados . 6 (1): 123–130. doi :10.1021/bc00031a015. PMID 7711098.