Hijo de John Seymour (c.1450-1491) y de Elizabeth Darrell, tenía como abuelos paternos a John Seymour, Alguacil de Wiltshire y a Elizabeth Croker.
Sus abuelos maternos eran Sir George Darrell y Margaret Stourton, hija de John de Stourton de Stourton, y Margery Wadham.
John se casó con Margery Wentworth en Savernake Forest, Wiltshire, quien poseía una belleza celebrada en una composición de John Skelton.
Tuvieron nueve hijos: Seymour falleció el 21 de diciembre de 1536 mientras su hija era Reina de Inglaterra y antes del nacimiento de su nieto, el futuro Eduardo VI de Inglaterra.
Por costumbre real, su hija no asistió a sus funerales.