La prueba de citrato detecta la capacidad de un organismo para utilizar el citrato como única fuente de carbono y energía.
Las bacterias se inoculan en un medio que contiene citrato de sodio y un indicador de pH como el azul de bromotimol . El medio también contiene sales de amonio inorgánicas, que se utilizan como única fuente de nitrógeno. El uso de citrato implica la enzima citrato liasa, que descompone el citrato en oxaloacetato y acetato . El oxaloacetato se descompone a su vez en piruvato y dióxido de carbono (CO 2 ). La producción de bicarbonato de sodio (NaHCO 3 ) así como de amoníaco (NH 3 ) a partir del uso de citrato de sodio y sales de amonio da como resultado un pH alcalino. Esto da como resultado un cambio del color del medio de verde (neutro) a azul (alcalino).
Las colonias bacterianas se recogen de un alambre recto y se inoculan en una pendiente de agar citrato Simmons y se incuban durante la noche a 37 °C. No se recomienda la inoculación a partir de un caldo de cultivo porque el inóculo sería demasiado pesado. Si el organismo tiene la capacidad de utilizar citrato, el medio suele cambiar su color de verde a azul, aunque el crecimiento en el medio incluso sin cambio de color se considera un resultado positivo. [1] Una observación de ausencia de crecimiento es un resultado negativo.
Ejemplos: